PRÁCTICA 7 - Recuento de reticulocitos

                             PRÁCTICA 7 - RECUENTO DE RETICULOCITOS                            18/11/2021

Objetivo: poder clasificar los reticulocitos según su grado de maduración.

Fundamento: observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción con colorantes vitales, que darán lugar a la precipitación de los restos de ARN. Deberíamos poder ver filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.

Materiales: papel de filtro, 2 gradillas, 3 pipetas pasteur, 2 portaobjetos, tubos de hemolisis, parafilm 

Muestra: sangre anticoagulada con EDTA 

Instrumento: Baño maría a 37ºC, microscopio óptico.

Reactivos: azul de cresil brillante.

Procedimiento:

1. Preparar todo el material y la zona de trabajo.

2. Con ayuda de la pipeta pasteur pipeteamos 3 gotas de azul de cresil brillante y las depositamos en un tubo de hemólisis

3. Homogeneizar el tubo que contiene la sangre anticoagulada con EDTA.

4. Con otra pipeta pasteur pipeteamos sangre y depositamos 3 gotas en el tubo de hemólisis que donde hemos vertido las 3 gotas anteriormente. Tapar el tubo de hemólisis que contiene la mezcla con parafilm, y lo homogeneizamos.

5. Colocar el tubo con la mezcla en una gradilla y la introducimos en el baño maría durante 5 min.

6. Pasado el tiempo establecido sacamos la gradilla que contiene el tubo y la homogeneizamos lentamente.

7. Tomamos una gota con otra pipeta pasteur y la depositamos en el portaobjetos.

8. Realizamos una extensión y dejamos secar al aire.

9. Observamos al microscopio con el objetivo 100X y colocamos una gota de aceite de inmersión sobre el portaobjetos.

Cálculos:                          Recuento de células: 150 x 8            Reticulocitos: 9

                                  9       x 100 = 0,45 % de reticulocitos

                              2000

Resultados: no hemos podido hacer el recuento porque no hemos observado reticulocitos en el microscopio. Esto es debido a que la sangre tiene mucho tiempo. 

Observaciones: 

- No hemos podido hacer bien el recuento porque no hemos observado demasiados reticulocitos en el microscopio. Esto es debido a que la sangre tiene mucho tiempo. 

- Tirar las pipetas pasteur utilizadas al contenedor de residuos biológicos.

- Depositar el material usado en un vaso de precipitado y luego lavar.

                 

                             

ACTIVIDADES DE REFUERZO

1.- ¿Qué son los reticulocitos?

Los reticulocitos son glóbulos rojos en desarrollo, es decir, son inmaduros. Transportan oxígeno de los pulmones a todas las células del cuerpo.

2.- ¿Qué tipo de tinción estamos utilizando?

Tinción vital.

3.- ¿Por qué hacemos la corrección del porcentaje de reticulocitos?

Para obtener un resultado más fiable y descartar errores en la técnica.

4.- ¿Qué nos expresa el IPR?

Nos expresa el Índice de Producción Reticulocitario. Indica que hay una hiperproducción de reticulocitos provocada por anemias muy intensas.