PRÁCTICA 8 - Recuento de hematíes

                                 PRÁCTICA 8 - RECUENTO DE HEMATÍES                                   29/11/2021  

Objetivo: Aprender la técnica y el procedimiento para el recuento de hematíes con sangre diluida mediante el empleo de la cámara de Neubauer.

Fundamento: Consiste en determinar el número de hematíes presentes en un volumen determinado de sangre diluida. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los hematíes estén separados unos de otros y así poder contarlos.

Hay que contar todas las células que están dentro de cada cuadrado mediano y aquellas que están tocando los lados superior y derecho de dicho cuadrado (aunque estén parcialmente fuera).

Materiales: papel de filtro, gradilla, 2 cámaras de Neubauer, micropipeta 1000 microlitros, 2 pipetas pasteur, cubreobjetos, pipeta diluidora, tubo de goma con boquilla adaptable a pipeta diluidora, puntas de micropipeta, vaso de precipitado, pipeta pasteur.

Instrumento: microscopio.

Reactivos: Líquido de Hayem.

Muestra: sangre capilar.

Procedimiento:

- Con micropipeta:

1. Hacemos la dilución en el tubo eppendorf 1/200. 

2. Cogemos 995 microlitros de líquido Hayem y 5 microlitros de sangre.

3. Homogeneizamos.

4. Depositamos 1 gota de la disolución en la cámara de Neubauer, ponemos el cubre encima de la cámara y, finalmente, observamos al microscopio.

- Con pipeta diluidora de Thoma:

1. Aspiramos la sangre hasta 0,5.

2. Aspiramos el líquido de Hayem hasta 101 con la ayuda de la pipeta diluidora y el tubo de goma con boquilla adaptable.

3. Desenganchamos el tubo de goma de la pipeta y homogeneizamos lentamente (sujetando la pipeta por los extremos con los dedos pulgar e índice). Agitar suave y horizontalmente durante 2-3 min.

4. Desechamos las 3 primeras gotas y depositamos la siguiente gota entre la cámara y el cubre. Colocamos la pipeta en posición casi vertical y la punta en el borde. Retiramos el dedo índice del otro extremo de la pipeta hasta ver que se ha llenado el espacio entre la cámara y el cubre.

5. Dejar reposar durante unos minutos para que las células sedimenten.

6. Con el microscopio, enfocar con el objetivo 40X y con el condensador a baja altura.

7. Contar los hematíes.

Cálculos: RBC = Nº hematíes x 5 x 10 = 21.850 x 200 = 4.370.000 hematíes/mm3

Resultados: hemos obtenido un recuento de 4.370.000 hematíes/mm3.