PRÁCTICA  13 - APTT                                               17/02/2022  

Objetivo: Determinación cuantitativa del tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT).

Fundamento: Los factores de la vía intrínseca de la coagulación presentes en la muestra se activan en presencia de un complejo fosfolipídico (cefalina) y de una sustancia activadora de los factores del contacto (ácido elágico).

Tras ello, se desencadena el proceso coagulatorio al recalcificar la muestra mediante la adición de una solución de Cloruro Cálcico.

Por último, se mide el tiempo transcurrido entre la adición del Cloruro Cálcico y la formación del coágulo de fibrina.

Materiales: papel de filtro, gradilla, pocillo de coagulómetro (2), rotulador, pipeta (100 microL), puntas de pipeta amarillas (7), coagulómetro, tubos de ensayo de plástico (4), un baño de agua ajustable a 37ºC.

Reactivos: R1 (reactivo activador del kit APTT ácido elágico de los laboratorios SPINREACT), R2 (reactivo activador del kit APTT elágico de los laboratorios SPINREACT) y un control.

Muestra: plasma.

Procedimiento: 

1. Tubo de plástico: añadir 100 microlitros de plasma y 100 microlitros de reactivo R1. Realizar a través de las paredes del tubo y evitar formar burbujas. Incorporar la mosca e introducir en el termobloque durante 5 minutos.

2. Mientras se realiza el primer paso, cogemos otra cubeta de plástico e incorporamos 120 microL de plasma (serían 100 microlitros, pero para asegurarnos que cogemos la cantidad exacta incorporamos 120) y asegurarnos de que nuestro tubo con sangre presenta plasma (capa blanquecina). Se realiza a través de las paredes evitando la formación de burbujas. Incorporar al termobloque.

3. Transcurridos los cinco minutos, introducimos el tubo de la muestra en el tapón negro, tecleamos Reset y vertemos inmediatamente el R2 justo en el momento que el coagulómetro marque 0.

4. Esperar a que suene el pitido y anotar el resultado. 

Resultado:  72,5 ''