2º TRIMESTRE    PRÁCTICA 9 - DETERMINACIÓN   DE   HEMOGLOBINA         13/01/2022                                                                                                           

Objetivo: determinar la cantidad de hemoglobina que hay en la muestra.

Fundamento: La hemoglobina se oxida, se forma metahemoglobina (hemoglobina alterada) y el cianuro la convierte en cianometahemoglobina. Esta sustancia va a colorearse de forma proporcional a la cantidad de hemoglobina que había en la muestra, es decir, le ponemos un reactivo a la sangre de nuestra muestra para que su hemoglobina se coloree. Ese color va a tener una absorbancia que nos va a determinar la cantidad de hemoglobina que hay en la muestra.

Materiales: papel de filtro, vaso de precipitado (1000 mL), auxiliar de pipeteo (color verde), pipeta de vidrio (5 mL), micropipeta ( 20 mL), gradilla, tubos de ensayo (3), frasco lavador y papel.

Reactivos: Reactivo de Drabkin.

Muestra: sangre capilar o venosa.

Procedimiento: 

1. Preparar el reactivo de trabajo (RT) ----->    4,9 mL de agua destilada + 2 gotas de reactivo

2. Preparar el blanco, el patrón y la muestra en 3 tubos de ensayo distintos.

  • Blanco. -----> Es el RT.
  • Patrón. ------> RT + 20 microlitros de calibrador.
  • Muestra. ----> RT + 20 microlitros de sangre.
3. Pasar cada dilución a una cubeta previamente rotulada.

Cálculos:
                             Bolsa 1                                         Bolsa 2
                             B ---> 0,519                                B ---> 0,113
                             M ---> 0,590                               M ---> 0,248
                              P ---> 0,541                                P ---> 0,429

 Fórmula:     Muestra - Blanco   x 15 = g/dl de hemoglobina en la muestra.
                      Patrón - Blanco

0,590 - 0,519  x 15 =  0,071  x 15 =  48,4 g/dl de hemoglobina en la muestra.
0,541 - 0,519              0,022











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