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Mostrando entradas de diciembre, 2021

PRÁCTICA 8 - Recuento de hematíes

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                                  PRÁCTICA 8 - RECUENTO DE HEMATÍES                                   29/11/2021   Objetivo: Aprender la técnica y el procedimiento para el recuento de hematíes con sangre diluida mediante el empleo de la cámara de Neubauer. Fundamento: Consiste en determinar el número de hematíes presentes en un volumen determinado de sangre diluida. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que los hematíes estén separados unos de otros y así poder contarlos. Hay que contar todas las células que están dentro de cada cuadrado mediano y aquellas que están tocando los lados superior y derecho de dicho cuadrado (aunque estén parcialmente fuera). Materiales: papel de filtro, gradilla, 2 cámaras de Neubauer, micropipeta 1000 microlitros, 2 pipetas pasteur, cubreobjetos, pipeta diluidora...

PRÁCTICA 7 - Recuento de reticulocitos

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                              PRÁCTICA 7 - RECUENTO DE RETICULOCITOS                            18/11/2021 Objetivo: poder clasificar los reticulocitos según su grado de maduración. Fundamento:  observar los reticulocitos al microscopio óptico mediante la tinción con colorantes vitales, que darán lugar a la precipitación de los restos de ARN. Deberíamos poder ver filamentos de color azul intenso en el interior de la célula. Materiales:  papel de filtro, 2 gradillas, 3 pipetas pasteur, 2 portaobjetos, tubos de hemolisis, parafilm  Muestra: sangre anticoagulada con EDTA  Instrumento: Baño maría a 37ºC, microscopio óptico. Reactivos: azul de cresil brillante. Procedimiento: 1. Preparar todo el material y la zona de trabajo. 2. Con ayuda de la pipeta pasteur pipeteamos 3 gotas de azul de cresil brillante y las depositamos e...

PRÁCTICA 6 - Separación por centrifugación

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                                    PRÁCTICA 6 - SEPARACIÓN POR CENTRIFUGACIÓN                        Objetivo:  Provocar, mediante la fuerza rotativa (centrifugación), la sedimentación de los sólidos o partículas de mayor densidad. Fundamento: si centrifugamos la sangre con un anticoagulante podemos obtener una separación de sus componentes en tres fases principales: en el fondo los hematíes, a continuación una fina capa blanca que contiene los leucocitos y plaquetas y, por último, una capa líquida que es el plasma. Materiales: tubos de hemólisis, papel parafilm, gradilla, 2 pipetas pasteur y frasco lavador. Instrumento: centrífuga. Muestra: sangre venosa anticoagulada. Procedimiento: 1. Preparamos 2 tubos de hemólisis con sangre anticoagulada y los tapamos con parafilm. 2. Centrifugar a 1500 rpm durante 30 minutos. 3. Interpreta...

PRÁCTICA 5 - Determinación del Hematocrito

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                          PRÁCTICA 5 -  DETERMINACIÓN DEL HEMATOCRITO                  15/11/2021    Objetivo: calcular la relación existente entre el volumen ocupado por los hematíes y el ocupado por la sangre total, expresada en forma de porcentaje. Fundamento: puede determinarse por métodos manuales o automáticos. Manuales : centrifugación a 12.000 - 15.000 rpm. Automáticos :   - Cálculo matemático del HTC a partir de los valores RBC y del volumen corpuscular                              medio.                           - Análisis de la sombra que produce la población eritrocitaria al reflejarse en un campo                            oscuro. Mat...

PRÁCTICA 4 - Tinción de Wright

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                                                PRÁCTICA 4 - TINCIÓN DE WRIGHT Objetivo:  facilitar la diferenciación de los tipos de células de la sangre. Fundamento: este colorante está basado en el uso de una mezcla formada por un colorante ácido (eosina) y un colorante básico (azul de metileno). Estos colorantes actúan con los componentes celulares dispuestos a modo de frotis sanguíneo sobre un portaobjetos. Materiales: cristalizador, puente de tinción, pipetas pasteur, frasco lavador, portaobjetos, gradilla,  Instrumento: microscopio. Reactivos:  azul de metileno, solución tampón pH 7,2 y aceite de inmersión Muestra: Sangre anticoagulada. Procedimiento:  1. Preparamos todo el material que vamos a utilizar y la zona de trabajo. 2. Realizar el frotis y dejar secar al aire. 3. Una vez seco, colocar el frotis sobre el puente de tinción y cubrir ...

PRÁCTICA 3 - Tinción de Giemsa

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                                            PRÁCTICA 3 - TINCIÓN DE GIEMSA Objetivo:  El objetivo de esta práctica es emplear este método para examinar frotis sanguíneos. Fundamento: utilizamos como colorante la mezcla de azul de metileno y eosina propuesta por Giemsa. Es una tinción diferencial que permite distinguir estructuras celulares según se tiñan con colorante ácido, básico o la mezcla de ambos. Materiales: papel de filtro, frasco lavador, portaobjetos, cristalizador, puente de tinción, vaso de precipitado para residuos, vaso de precipitado con agua de grifo/agua destilada, pipeta pasteur, tubos de ensayo, gradilla, papel parafilm, pipetas de vidrio graduadas (1 ml y 2 ml /5 ml), auxiliar de pipeteo, papel. Instrumento: microscopio. Reactivos:  colorante Giemsa, metanol, solución tampón pH 7,2, aceite de inmersión y sangre capilar. Procedimiento: 1. Preparar la...

PRÁCTICA 2 - Tinción de Panóptico rápido

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                           PRÁCTICA 2 - TINCIÓN DE PANÓPTICO RÁPIDO                             25/10/2021 Objetivo:  preparación rápida de un frotis sanguíneo teñido mediante un uso sucesivo de tres soluciones. Fundamento: Es una tinción hematológica, diferencial, no vital, que se realiza sobre células muertas. Es un método de inmersión, donde el frotis se sumerge en la solución colorante. Materiales:  papel de filtro, rotulador, gradilla, cubetas, portaobjetos, frasco lavador, pipeta pasteur, vaso de precipitado para residuos, cristalizador, puente de tinción, aceite de inmersión. Instrumento: microscopio. Reactivos:  - Solución 1: solución alcohólica de triarilmetano. - Solución 2: solución tamponada de xanteno. - Solución 3: solución tamponada de tiazina. - Agua destilada. Muestra: frotis sanguíneo preparado y dejado secar al air...

PRÁCTICA 1 - Preparación de sangre en fresco

                       PRÁCTICA 1 - PREPARACIÓN DE SANGRE EN FRESCO                     18/10/2021 Objetivo: El objetivo de esta práctica es visualizar la estructura natural de las células sanguíneas sin la aplicación de ningún colorante. Fundamento: Materiales: portaobjetos, cubreobjetos, lanceta, algodón, alcohol etílico. Instrumento: microscopio. Procedimiento:  1.  Cogemos un trozo de algodón, lo mojamos en alcohol etílico y desinfectamos la yema del dedo donde vamos a realizar la punción. 2. Una vez se ha secado el dedo, cogemos la lanceta y pinchamos en el lateral del dedo. 3. Realizamos una leve presión para que salga un poco de sangre y desechamos la primera gota. 4. Colocamos una gota en el centro del porta y colocamos el cubre justo encima. 5. Depositamos la preparación en la platina del microscopio para proceder a la observación. Resultados: He podi...